Tirzepatid urenheder

Tirzepatid Urenheder|Tilpeptid urenhedskontrol|Urenhedsbrugerdefineret syntese og strukturbekræftelse|Videnskab-Peptid

Tirzepatide urenheder kontrol - for GLP-1/GIP dobbelt-target lægemiddelkvalitetsforskning, generisk lægemiddelrapportering.Science-Peptide leverer tilpasset syntese af tilpeptid-relaterede urenheder, herunder sletningspeptider, oxiderede urenheder, fedtsyreeksfolieringsprodukter, etc. understøtter dine struktureringsprodukter, dimerer, understøttelse af dine strukturer. urenhedsspektroskopiundersøgelse med strukturelle bekræftelsesdata. Velkommen til at kontakte os.

Tirzepatide (Tirzepatide) er den GLP-1/GIP dobbeltagonist, som Eli Lilly fandt på, og den har været i fuld gang i disse to år. Det har en god effekt af at sænke sukker og en stærk effekt af vægttab, og kaldes den opgraderede udgave af "mirakelmidlet til vægttab". Indenlandske producenter af peptid generiske lægemidler, mange stirrer på det - efter udløbet af patentet, hvem kan først løbe gennem kvaliteten af ​​forskning, der vil have mulighed for at få fat i den første generiske.

 

Kvaliteten af ​​tilpeptid er dog ikke så let at studere. Det er mere komplekst end simethicon med 39 aminosyrer, en fedtsyresidekæde (eicosandisyre) og en linker. De urenheder, der kan forekomme under synteseprocessen, er meget højere end for almindelige peptider. Manglende peptider, oxidative urenheder, fedtsyreudskillende produkter, dimerer, linker-relaterede urenheder skal hver især have en kontrol, hver skal være klar.

 

Vi har samlet en masse erfaring i syntese af komplekse peptidurenheder. Vi har specialiseret os i studiet af tilpeptid, og vi ved, hvad der er vanskelighederne i dets urenhedsprofil, og hvad der er de væsentlige kontrolelementer. Vi kan tilpasse syntesen af ​​forskellige tilpeptid-urenhedskontroller i henhold til dine behov, med strukturbekræftelsesdata, og hjælpe dig med at etablere metoden, så du vil være mindre tilbøjelig til at få udstedt et supplement, når du arkiverer.

Tilpeptidets molekylære struktur bestemmer, at dets urenhedsprofil er meget mere kompleks end generelle peptiders. Når vi laver urenhedsundersøgelser, fokuserer vi hovedsageligt på disse kategorier:

Manglende peptid
De 39 aminosyrer, hvoraf enhver savnes under synteseprocessen, er en urenhed. Retentionstiderne for de manglende peptider på HPLC var bredt fordelt med forskellig polaritet af de manglende peptider i forskellige positioner. Nogle mangler ved N-terminalen, nogle i midten og nogle i nærheden af ​​fedtsyrebindingsstedet. Vi har modtaget en ordre fra en kunde på 15 manglende peptider i forskellige positioner for at lokalisere alle mulige manglende urenheder i deres proces.

Oxiderende urenheder
Opfyldt i sekvensen af ​​tilpeptid er modtagelig for oxidation til sulfoxid og derefter til sulfon. Oxiderede urenheder optræder ofte i stabilitetsundersøgelser og vokser efter en periode. Vi har lavet en sammenligning, under accelererede forhold i en måned, kan oxidationstoppen vokse til mere end 0,3% uden kontrol.

Fedtsyreudskillende produkter
Dette er en urenhed, der er unik for tilpeptid. Dens fedtsyresidekæde (eicosandisyre) er knyttet til lysin gennem en linker, og denne modifikation kan delvist udskilles under syntese eller opbevaring, hvilket resulterer i, at fedtsyrer-fjerner urenheder. Mere problematisk kan udskillelsen forekomme på forskellige steder - mellem fedtsyren og linkeren, eller mellem linkeren og peptidet -, hvilket resulterer i forskellige urenheder. Vi har syntetiseret adskillige fedtsyrerelaterede urenheder- til vores kunder, lige fra fuldstændig udskillelse til kun en lille sektion.

Dimerer/polymerer
To eller flere tilpeptidmolekyler klynger sammen for at danne en dimer eller højere. Dimerens molekylvægt er dobbelt så stor som hovedtoppen, og den er ofte en bred top på HPLC, så den skal særskilt adskilles og oprenses, før den kan bruges som kontrol. Vi har lavet tilberedning af dimerer, og det tog flere rensningsrunder at opnå en renhed på mere end 95%.

Linker-relaterede urenheder
Fedtsyremodifikationen af ​​tilpeptid bruger en linker (f.eks. -Glu, PEG, etc.), og denne linker kan i sig selv producere sidereaktioner under syntese, hvilket genererer urenheder med manglende eller ufuldstændige linkere. Denne form for urenhed findes ikke i almindelige peptider, men er unikke for tilpeptid, som skal undersøges specifikt.

Deamiderede urenheder
Asparagin (Asn) og glutamin (Gln) deamideres let under sure eller opvarmningsforhold, hvilket resulterer i isomerer. Der er flere Asn og Gln i sekvensen af ​​tilpeptid, og deamideringsurenheden optræder ofte i den forcerede nedbrydningstest, så kontrolproduktet skal bruges til at lokalisere urenheden.

Diastereoisomerer
Under den lange kædesyntese kan individuelle aminosyrer gennemgå racemisering, hvilket resulterer i diastereoisomerer. Indholdet af denne form for urenhed er normalt ikke højt, men eksperter vil spørge, når de deklarerer, og det er bedre at have et kontrolprodukt til bekræftelse.

Mange af disse urenheder kan ikke købes og skal specialfremstilles. Vi har lavet en masse projekter om tilpasning af tilpeptid-urenheder, der dækker alle ovennævnte kategorier.

Sletningen af ​​peptidserien
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, med MS og NMR bekræftelse. Vi har syntetiseret et sæt peptider med 5 aminosyremellemrum fra N-terminal til C-terminal.

Oxiderende urenheder
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95 %, og vi kan levere LC-MS-spektret for at bekræfte oxidationsgraden. Sulfoxid og sulfon adskilles ved HPLC, og vi kan begge dele.

Fedtsyreudskillende produkter
Dette er en af ​​de sværeste urenheder at arbejde med i tilpeptid. Fedtsyrekæden kan være helt af, eller den kan være delvist af (f.eks. mangler de sidste par kulstoffer). Vi kan syntetisere en række varianter til forskellige positioner i kæden. I et af de mest komplicerede projekter, vi har lavet, bad kunden os om at syntetisere en urenhed med 8 carbonatomer, der mangler i fedtsyrekæden, og det tog os to måneder at få det rigtigt.

Dimer
Dimerer dannet ved tværbinding eller ikke-kovalente interaktioner kan fremstilles ved forskellige metoder og isoleres og oprenses for at give kontrol med høj renhed. Dimerer er besværlige at rense, men vi har erfaringen med at vide, hvordan man adskiller monomererne.

Linker-relaterede urenheder
Linkeren (-Glu, PEG osv.) kan mangle eller være ufuldstændig, hvilket resulterer i en række relaterede urenheder. Vi kan syntetisere forskellige varianter med manglende linkere, forkortede linkere eller mismatchede linkere og hjælpe dig med at opbygge spektrene af sådanne urenheder.

Deamiderede urenheder
For Asn- og Gln-stederne i sekvensen kan vi fremstille deamiderede urenhedskontroller ved tvungen nedbrydning eller målrettet syntese. Forskellen i molekylvægt efter deamidering er kun 1, hvilket ikke er let at skelne fra MS, så vi bruger normalt NMR eller specielle kromatografiske forhold til at bekræfte.

Andre tilpassede urenheder
Hvis du finder en ny ukendt urenhed i din forskning, kan vi hjælpe dig med at analysere strukturen og syntetisere den. Send os prøverne, vi laver LC-MS-analyse, udleder strukturen, derefter retningsbestemt syntese og sammenligner derefter retentionstiden og massespektret for at bekræfte overensstemmelsen. Vi har gjort denne proces mange gange, og succesraten er ret høj.

Analytisk metodeudvikling og validering
Ved opsætning af en HPLC- eller LC-MS-metode kræves der en urenhedskontrol til lokalisering, bestemmelse af separation, verifikation af lineært område og gendannelse. Uden kontrollen mangler metodevalideringen en brik. Mange kunder beder os om at lave nogle få vigtige urenheder først for at sætte metoden op, og derefter langsomt fylde resten op.

Heterogen massespektrometri
Når et generisk lægemiddel deklareres, kræves en omfattende kvalitativ og kvantitativ analyse af procesurenheder og nedbrydningsprodukter. Placeringen, indholdet og strukturen af ​​hver urenhed skal bekræftes af et kontrolprodukt. Vi har set erklæringen af ​​oplysningerne blev sendt til at udfylde, ni gange ud af ti er urenhederne i dette stykke ikke forstod.

Stabilitetsstudier
I langsigtede-stabilitets- og accelererede tests er det nødvendigt at bestemme, hvilke nedbrydningsprodukter der er dominerende, og hvad tendensen i indhold er. Med urenhedskontrollen kan vi nøjagtigt kvantificere og overvåge. En kunde udførte stabiliteten af ​​tilpeptidpræparation og fandt ud af, at en nedbrydningstop voksede meget hurtigt under accelererede forhold, så vi analyserede og syntetiserede det af MS for at bekræfte strukturen, og så var kunden lettet over at rapportere det.

Batchfrigivelsestest
Efter kommercialisering skal hver batch af API eller formulering testes for det pågældende stof. Urenhedskontrol er væsentlige værktøjer til frigivelsestest.

Oplysninger om generiske lægemiddeldeklarationer
Urenhedsundersøgelser er en nøgledel af arkiveringsoplysningerne. Levering af fuldstændig urenhedsprofilering og kontroldata reducerer risikoen for en anmeldelsesfrigivelse markant.

Case 1: et lægemiddelfirma, tilpeptid generisk lægemiddelprogram
De er ved at udvikle en generisk version af tilpeptid og har brug for et komplet sæt urenhedskontroller til metodevalidering. Vi tilpassede 12 urenheder til dem: 5 manglende peptider, 2 oxiderede urenheder, 1 dimer, 2 fedtsyreudskillende produkter og 2 linker-relaterede urenheder. Hver af dem har en renhed på mere end 95% og er ledsaget af MS- og NMR-data. Projektlederen sagde, "urenhederne i tilpeptid er dobbelt så mange som andre peptider, men du kan lave dem alle, og dataene er fuldstændige, hvilket sparer os for en masse arbejde." Senere blev valideringen af ​​deres metode gennemført med succes, og nu forbereder de sig på erklæringen.

Case 2: En CRO-virksomhed, urenhedsprofilering
De gennemførte et kvalitetsforskningsprojekt om tilpeptid, som krævede en omfattende analyse af procesurenheder. De sendte os de rå peptidprøver, og vi udførte LC-MS-analyse, udledte de mulige strukturer af adskillige ukendte urenheder, syntetiserede dem derefter på en målrettet måde og sammenlignede retentionstider og massespektre og bekræftede, at fire nye urenheder - to af dem var linker-relaterede, og to af dem var varianter af fedtsyreudskillelse. Klienten brugte disse data til at forfine urenhedsprofilerne og bestod med succes kundens accept.

Case 3: Stabilitetsstudier, en bioteknologivirksomhed
De undersøgte stabiliteten af ​​en tilpeptidformulering og fandt ud af, at mængden af ​​et nedbrydningsprodukt steg hurtigt under accelererede forhold, men de vidste ikke, hvad det var. Vi analyserede prøven ved LC-MS og antog, at det var en deamideringsurenhed på et bestemt Asn-sted, og syntetiserede den derefter på en målrettet måde og bekræftede den ved sammenligning. De etablerede et assay ved hjælp af denne kontrol og overvågede nøjagtigt tendensen for nedbrydningsproduktet. Senere, da de afgav rapporten, blev denne del af dataene fremhævet af eksperterne, og på grund af de solide data blev der ikke udstedt nogen kompensation.

Tilpeptid er et populært produkt, men undersøgelse af urenheder er en delikat opgave, især fedtsyreeksfolieringsprodukter og linker-relaterede urenheder, som mange producenter ikke kan håndtere. Hvis du laver kvalitetsforskning eller generisk udvikling af tilpeptid og har brug for urenhedskontrol, er du velkommen til at kontakte os. Vi har gjort meget arbejde, vi ved, hvad vanskelighederne er, og vi ved, hvordan vi skal klare det.